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细胞粘附实验

产品介绍

细胞粘附实验实验原理
细胞粘附实验通常分为两类,即细胞与细胞粘附和细胞与基质粘附。机体内许多细胞,如上皮细胞固定在某处发挥功能;另一些细胞,如白细胞,活跃运动,就需要不断调节细胞粘附。细胞粘附性的改变在肿瘤转移过程中也发挥着重要作用。恶性肿瘤具有从原发瘤分离及在体内扩散的能力,提示这些细胞相互识别及粘附机制发生了改变。用到测定细胞粘附性的实验有:机械法测定细胞粘附性,发射性核素法测定细胞粘附性,细胞分离实验和肿瘤细胞聚集体形成实验。

实验步骤
试剂:FN纤连蛋白,BSA试剂,96孔板,MTT或CCK-8试剂
1.用10 µg/ml的FN预铺96孔板,70 µL/孔,4℃后,PBS洗3遍,再用1% BSA于37℃封闭1 h,PBS洗3遍
2.待测细胞培养至对数生长期,消化细胞,用无血清培养基悬浮细胞,用血球计数板计数,调整浓度为5*105/mL分别接种于预铺FN的96孔板中,每孔5000个细胞,每组设3个复孔。37 ℃孵育1 h后,PBS洗去未黏附的细胞。

检测方法
方法1:3.5%戊二醛于4 ℃固定0.5 h,PBS 洗3遍;0.1%的结晶紫染色,室温静止0.5 h,PBS洗3 遍,每孔加入100 μL 10%的乙酸,5~10 min后用酶标仪检测595 nm的吸光度值,用以表示黏附细胞的多少。
方法2:按照每孔加入100 µL甲醇,固定15 min每孔加入100 µL吉姆萨染液,染色15 min,PBS洗去染液倒置显微镜下随机取5个随机视野计数粘附细胞数量病拍照,统计结果。
方法3:MTT法或CCK-8检测细胞量。

客户需要提供
1 客户提供实验分组情况及实验背景资料,有具体要求请事先说明;
2 细胞株(也可以由我们提供)、干预因素原料;
3 干预药物及浓度。

目前,上海剑钝生物科技有限公司,主营实验技术服务、SCI服务、动物模型构建、细胞株、elisa试剂盒等,欢迎广大科研爱好者前来咨询选购!

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