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真核表达载体构建实验外包

产品介绍

一、服务介绍
分子克隆是在分子水平_上提供一种纯化和扩增特定DNA段的方法。常含有目的基因,用体外重组方法将它们插入克隆载体,形成重组克隆载体,通过转化与转导的方式,引入适合的寄主体内得到复制与扩增,然后再从筛选的寄主细胞内分离提纯所需的克隆载体,可以得到插入DNA的许多拷贝,从而获得目的
基因的扩增。
二、实验原理
外源DNA与载体分子 的连接就是DNA重组,这样重新组合的DNA叫做重组体或重组子。重组的DNA分子是在DNA连接酶的作用下,有Mg2+、ATP存在的连接缓冲系统中,将分别经酶切的载体分子与外源DNA分子进行连接。DNA连接酶有两种: T4噬菌体DNA连接酶和大肠杆菌DNA连接酶。两种DNA连接酶都有将两个带有相同粘性末端的DNA分子连在一起的功能 ,而且T4噬菌体DNA连接酶还有一种大肠杆菌连 接酶没有的特性,即能使两个平末端的双链DNA分子连接起来。但这种连接的效率比粘性末端的连接效率低,-般可通过提高T4噬菌体DNA连接酶浓度或增加DNA浓度来提高平末端的连接效率。.

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