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RNA干扰实验

产品介绍

 RNA干扰( RNA interfering,RNAI)现象是指由与靶基因序列同源的双链RNA(DsRNA)弓|发的基因转录后的沉默过程,小干扰RNA特异性介导相同序列的mRNA降解,阻断相应基因表达。晶莱生物提供的RAN干扰技术包括化学合成小RN段( SiRNA)和构建载体RNA ( SnRNA)两种形式。实验委托者只需提供干预基因名称或基因序列D,设计合适的干预位点,保证至少有- -对小RNA有效抑制目的基因表达,抑制效率不低于70%。
RNA干扰( SiRNA实验)流程
确定干扰基因, 设计并合成合适的小干扰RNA (片段型或载体型小干扰RNA)。
预转染实验,进行细胞培养,摸索转染条件、时间并进行必要的检测(WB、PCR等),确定干预效果的一对小RNA。
第三步正式实验,设置合理实验分组,进行瞬时或稳定转染。
第四步转染后检测,根据实验要求选择细胞生物学检测、蛋白检测、分子生物学检测等。以研究小干扰RNA对于细胞、蛋白或基因功能的影响。RNA干扰( SiRNA实验)检测(可根据委托者实验需求选择做)
1.细胞检测:细胞增殖毒性MTT、细胞凋亡、细胞周期、细胞迁移、细胞侵袭;
2.蛋白检测:免疫印迹WB、免疫细胞化学ICC、免疫荧光IF、流式细胞术FCM、酶联免疫EL SIA;
3.分子生物检测: RT-PCR、实时荧光定里PCR、甲基化特异性PCR(MSP); .
4.其他检测:生化检测、酶类检测、脂类检测、糖类检测。

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