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人肝原代细胞
人肝原代细胞
功能
1肝脏的主要功能是能量代谢、外源性化学物质生物转化和血浆蛋白合成。
2肝细胞可进行细胞移植、基因治疗。
人肝原代细胞
特性
1组织来源于正常人体肝脏组织。
2鉴定：albumin, Cytokeratin-18 and Vimentin免疫荧光染色。
3推荐使用人肝细胞专用培养基（本公司可订购）
4经检测不含HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌
5该细胞只用于科研
人肝原代细胞
运输
新鲜活细胞运输或冻存细胞干冰运输
人肝原代细胞
保存及应用
如是新鲜原代细胞，请于收到后放入CO2培养箱内静置2-3h后再进行实验操作；如是冻存细胞，收到后可放入液氮或-80℃冰箱保存也可进行复苏操作。
原代肝细胞分离方法
体外培养肝细胞的关键是如何分离得到形态完整、体外代谢活性高的肝细胞. 自1953年Anderson
*剪切法从肝脏分离肝细胞以来, 各实验室对肝细胞的分离方法进行了不断改进.在众多方法中, 主要分为非灌流的方法和灌流的方法.
1.1 采用非灌流的方法
早期的研究一般通过非灌流这种简单的步骤分离肝细胞.
1.1.1 机械分离法:
机械分离法是利用机械剪切及强力吹打等物理手段来分离肝细胞的方法.张顶 et al在分离树鼩肝细胞的过程中, 先将树鼩的肝脏剪成小块, 然后通过挤压、剪碎和震荡等机械手
段, 使肝细胞从肝组织上脱落, 从而获得互相分离的肝细胞.
1.1.2 胰酶消化法:
胰酶消化法是利用胰酶来破坏肝细胞之间的桥连, 使肝细胞分离的一种方法.
Dulbecco et al次采用胰酶来分离猴肾细胞、大鼠肝细胞, 并运用到体外细胞的研究和培养中. 刘友平 et al[6]利用该方法分离肝细胞时, 先取出小鼠的肝组织用眼科剪剪碎至糊状, 然后用缓冲液充分清洗并加入胰酶进行消化. 待消化后用D-Hank's液清洗, 后加入含有血清的培养液终止胰酶的作用, 得到消化的细胞悬液.
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