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    天狼猩红染色

    点击次数:844 发布时间:2017-08-21

    一、服务介绍

    天狼猩红染色可用于区分Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ型胶原,由于胶原呈碱性,与酸性染料起强烈反应,天狼星红就是一种很强的酸性染料,胶原的双折光现象将会强烈地显现。而且可以在同一张切片上同时显示它们相互之间的关系,直接观察分析纤维化程度,主要应用于各种组织病变时对胶原纤维异常或纤维增生的研究中。

     

    二、天狼猩红染色实验原理

    天狼星红是一种强酸性阴离子染料,每个分子含有6 个磺酸基,易与胶原蛋白的碱性氨基酸集团紧密结合,染色后不褪色且具特异,染料分子长形展开,在胶原长轴方向以平行排列的方式附着胶原分子。当有偏振光照射时,天狼星红可以和胶原纤维反应使胶原纤维产生明显的双折光现象。不同的胶原纤维具有不同的旋光性,在偏振光显微镜下呈现相异的颜色,借以区分Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ型胶原,Ⅰ型纤维:紧密排列, 显示很强的双折光性,呈黄色或红色的纤维;Ⅱ型纤维:显示弱的双折光,呈多种色彩的疏松网状分布;Ⅲ型纤维:显示弱的双折光,呈绿色的细纤维;Ⅳ型纤维:显示弱的双折光的基膜,呈淡黄色。

     

    三、天狼猩红染色实验流程

    1. 组织固定于4%多聚甲醛液,制备石蜡切片。

    2. 切片脱蜡至水化后,天狼星红染色液滴染1 h。

    3. 自来水稍洗,洗去多余染料。

    4. 苏木精染胞核8-10 min,流水中冲洗10 min。

    5. 无水乙醇I中脱水30 s,无水乙醇II中脱水3-5 min。

    6. 二甲苯透明、中性树胶封片。

    7. 偏振光显微镜下观察染色结果。

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