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    基底动脉栓塞动物模型

    点击次数:692 发布时间:2018-03-29

                            基底动脉栓塞动物模型

    (1)复制方法  体重为400~450g的纯白红目雄性豚鼠,按35mg/kg体重的剂量经腹腔注射戊巴比妥钠麻醉,然后动物仰卧位保定,用特制头架固定头颅,气管插管,自主呼吸,切开左颈动脉,于近心端插入肝素化动脉导管,用压力传感器和前置放大器测量平均动脉压(mean arterial pressure, MABP),经激光多普勒流量仪的A/D转换器转换信息后输入计算机的应用软件进行记录及分析。经腹侧径路打开右侧听泡,暴露耳蜗,正中分离胸骨舌骨肌及附于枕骨底的头长肌,暴露枕部颅底,磨开一骨窗,暴露并游离基底动脉,以滤纸条包裹;分离右侧颈动脉,于其下方穿过一丝线供结扎用,结扎线打单结但不拉紧。用棉拭子拭去耳蜗基底转外侧壁的黏骨膜,以三维固定器固定激光多普勒流量仪探头,使之平切于耳蜗基底转外侧壁,测量耳蜗血流量(blood flow of cochlea, CBF),待CBF和MABP稳定后,记录5min为诱导栓塞前的基础水平,再拉紧结扎线结扎右侧颈动脉,在包裹基底动脉的滤纸条上点滴40%FeCl3水溶液2滴,连续记录 CBF及MABP 50min。CBF和MABP的数据均以诱导栓塞前为100%,计算诱导栓塞后CBF和MABP的变化百分率,后对存入计算机的资料进行数据处理,作配对t检验。

    (2)模型特点  用本方法诱导后5~10min,模型动物 CBF开始下降,与诱导前比较,差异极显著;随着诱导时间的延长,CBF下降值逐渐增大,至诱导50min时,CBF与诱导前比较,差异亦有极显著性意义;在整个造模过程中,CBF均值与诱导前比较,差异亦有极显著性意义,但MABP无明显变化。由于椎基底动脉与颈动脉有大脑动脉环(willis Circle)彼此交通,因此,在制作基底动脉栓塞内耳缺血动物模型时,还应考虑到大脑动脉环在基底动脉栓塞后形成侧支供血问题。本方法将一侧颈动脉插管,结扎另一侧颈动脉,随即诱发基底动脉栓塞,使基底动脉供血区血流下降。以往研究报道所建立的内耳缺血模型,多以耳蜗动作电位、脑干听诱发电位及普通组织病理学变化为观察指标,间接判断内耳微循环变化。也有使用生物微球技术粗略地估计CBF变化,或单纯使用激光多普勒技术进行CBF测量,未考虑血压波动对CBF的影响。本研究采用激光多普勒技术,直接测量基底动脉栓塞前后CBF变化,同时测量MABP并与CBF信号同步输入计算机,不但直观,且可计算CBF及 MABP的变化,观察MABP对CBF的影响。

    (3)比较医学  采用本方法可诱导出豚鼠基底动脉栓塞,为临床动脉栓塞所致内耳微循环障碍机制的研究,以及抗栓药物的开发应用提供一个理想的实验动物模型。由于动脉栓塞所致内耳微循环障碍性疾病日益增多,制作一内耳供血动脉栓塞的动物模型。但这种动物模型的建立方法仍然是一个需要改进的问题。本模型制作方法选择栓塞前下小脑动脉以近的基底动脉,无论内耳动脉是直接来自基底动脉还是来自前下小脑动脉,都可达到减少内耳供血的目的。目前,用于诱导血栓形成的方法很多,如光化法、电流刺激法、化学试剂诱导法等。而本模型采用的制作方法耗费低廉,操作简单,栓塞部位准确,栓塞动脉病理学变化与人相似。本方法诱导的基底动脉栓塞所需时间恰当,使得在动物模型上进行抗栓药物研究时,CBF的变化能有效地记录下来。综上所述,运用本方法诱导基底动脉栓塞,导致了内耳 CBF减少,为内耳微循环障碍机制的研究及抗栓药物的研究提供了一理想的动物模型,对临床动脉栓塞所致内耳微循环障碍性疾病的治疗有积极意义。

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