创伤后应激障碍（PTSD）动物模型

创伤后应激障碍(PTSD)动物模型

创伤后应激障碍是对严重应激因素的一种异常精神反应，可由战争、社会暴力事件、重大交通事故和自然灾害等创伤意外引起。其临床表现多样化，主要包括创伤经历的再体验、情感麻木与回避行为、警觉增高所致的易激惹等症候。

1 电刺激大鼠海马模型(Model of stimulating hippocampus of rats by electricity)

(1)复制方法  健康大鼠，雌雄不拘，体重为200～220g。

1)埋植电极及电刺激  大鼠经腹腔注射戊丨巴丨比丨妥丨钠(按50～60mg/kg体重的剂量)或水合氯醛(按350～400mg/kg体重的剂量)麻醉后固定于立体定位仪上，剪除头顶部毛发，手术区域常规消毒，按大鼠脑图谱确定海马CA1区，无菌操作。牙科钻于前囟后4.5mm、旁开5.0mm钻孔，将双极漆包不锈钢电极(直径为0.2mm，尖距为0.1mm)埋植于海马CA1区(硬脑膜下5.5mm)。牙科水泥固定电极，术后连续肌肉注射庆大霉素5d，每只2万U/d。动物恢复1周后开始实验。电刺激参数：波宽为1ms、频率为25Hz、串长为10s、刺激强度为100μA、恒流、单向方波，每天刺激8次，串隔7min，连续刺激5d。

2)行为学观察  观察后一次电刺激停止后1d、1周及1个月时动物情感行为改变。

惊吓反应：观察动物接受反复、短暂(1～2s)高频金属音刺激后行为习性、自主活动及适应能力的变化。

旷场活动性：将大鼠轻轻放入旷场行为观察箱(60cm×60cm×60cm的无顶木盒，箱底用墨线分成36个相等的方格)中央小方格内，观测30s内动物的活动情况。计分标准：大鼠1/2以上身体从所在方格进入相邻方格计1分；大鼠后肢性站立计1分；二者相加为其所得总分。

拒俘反应性：以动物从未接触过的手套轻抓大鼠，观察其反应。记分标准：0：很容易抓取动物；1：尖叫或回避；2：尖叫并回避；3：逃脱；4：逃脱并尖叫；5：咬或试图撕咬手套；6：主动跃起攻击。

3)动物行为学变化

惊吓反应观察：短暂高频金属音刺激时，对照组动物出现1～3s的轻微惊吓反射，重复3次以上同样刺激后很快适应。电刺激组动物在电刺激停止后1个月内，以同样高频金属音刺激时出现明显的惊吓反应，表现为全身性惊吓反射、反应幅度增大，持续时间长(5～10s)，并出现打洞、埋头、趋暗性等多种躲藏、逃避性焦虑样行为，且对刺激的适应时间明显延长，反复刺激6～10次后仍有较明显的惊吓反应。

情感行为观察：电刺激停止后1个月内电刺激组动物旷场活动性较对照组明显减少，拒俘反应性则显著增强。

(2)模型特点  此模型以海马CA1区为诱发部位，通过重复电刺激，诱发与PTSD临床表现相似的情感行为障碍。实验中，要求所施电刺激既可诱发海马后放电，以大限度地引发实验动物情感行为异常，同时又控制其持续时间在限度内，尽量减少实验中可能出现惊厥行为及其他影响因素。另外，数量的电刺激累积对产生明显、持续的情感行为障碍至关重要。

(3)比较医学  此模型中通过重复电刺激海马CA1区，诱发了实验动物明显的、较长时程的活动习性改变、警觉水平增高、惊恐行为、环境适应能力下降、躲藏逃避反应等多种与人类的PTSD相似的精神、行为异常表现。这显示了该模型稳定性好，诱发率高，效应持久，对动物损害较小，可基本再现PTSD的主要临床症状。

2 加强捕食应激模型(Model of intensive predator stress)

(1)复制方法  健康大鼠，雌雄不拘，体重为200～220g。

1)模型制备  将鼠放入捕食应激实验箱(1m×1m×1m铁丝笼，中间固定一个20cm×20cm×20cm的小铁丝笼，以便在实验中将鼠放入其中，笼中设一蜂鸣器)的小笼中，在蜂鸣器鸣叫的同时将一只饥饿的猫放入实验箱中，使猫与鼠无生理伤害性接触10min后将猫取出。在单纯捕食应激后1周时重复上述过程，但蜂鸣后不再放入猫，将鼠在实验笼中静置5min。

2)行为学观察  观察捕食应激后第3日、第2周及第1个月时行为改变。包括：惊吓反应，旷场活动性和拒俘反应性。

(2)模型特点  动物在1个月内，在受到同样高频金属音刺激时均出现明显的惊吓反应，表现为全身性惊吓反射、反应幅度增大、持续时间长(5～10s)，并出现打洞、埋头、趋暗性等多种躲藏和逃避性焦虑样行为，且对刺激的适应时间明显延长，在反复刺激6～10次后仍有较明显惊吓反应。旷场活动性减少，拒俘反应性则增强。

(3)比较医学  利用动物食物链中特殊的捕食关系，观察严重心理应激对鼠的行为及空间学习记忆能力的影响。本模型通过加强捕食应激，诱发了动物明显和较长时程的活动习性改变、警觉水平过高、惊恐行为、环境适应能力下降、躲藏逃避反应等多种精神和行为的异常表现。这显示本模型具有与PTSD相似的致病因素与过程，诱发效应持久，可基本满足其主要临床表现，不失为进一步研究PTSD致病机制的较理想的动物实验模型。