招聘服务

Products

产品中心

  • 实验技术服务

  • 细胞株

  • Elisa试剂盒

  • 首页>技术文章>输尿管内置管建立兔单侧输尿管梗阻肾小管间质纤维化模型

    技术文章 Article

    输尿管内置管建立兔单侧输尿管梗阻肾小管间质纤维化模型

    点击次数:608 发布时间:2018-09-29

    输尿管内置管建立兔单侧输尿管梗阻肾小管间质纤维化模型

    (1)复制方法  体重2~3kg新西兰兔,经静脉按30mg/kg体重的剂量注射戊丨巴丨比丨妥丨钠麻醉,动物仰卧固定于手术台上,腹部皮肤常规消毒、去毛。作脐下腹直肌外侧旁直切口,切开腹外斜肌腱膜,暴露腹内斜肌,分开腹横肌,向内侧推开腹膜,钝性分离腹膜,在髂血管前找到输尿管,游离输尿管,用艾利斯(Allis)钳固定输尿管,用剪刀剪开输尿管1/3管径(此处距离肾盂4~5cm),将F2导管向输尿管近端逆行插入2~3cm,可见到尿液经导管流出,用1号丝线结扎输尿管远端,固定输尿管及导管,将导管远端结扎闭合,埋藏于皮下,以备收集标本用。按120~150mg/kg体重剂量,分别在预定时间经静脉给模型兔注射3%的菊糖溶液。然后取梗阻侧的肾盂尿,无梗阻侧的肾盂尿,血液标本,作菊糖浓度,转化生长因子β1(TGF-β1)浓度测定;并处死动物,取肾脏标本,经10%甲醛固定,作常规石蜡组织切片,HE染色,光镜下观察。

    (2)模型特点  术后模型动物梗阻侧尿液中菊糖浓度明显低于正常值;而梗阻侧尿液中TGF-β1浓度则明显高于正常侧,表明梗阻侧肾脏功能受损害,且分泌TGF-β1显著增加。模型动物肉眼大体观察梗阻侧肾脏体积较正常增大,肾盂、肾盏扩大,输尿管增粗,管腔扩大。镜下病理组织学观察显示,梗阻侧肾脏肾皮质部分间质充血、水肿,同时伴有数量不等的炎症细胞浸润;肾髓质间质充血、水肿,并可见不同程度炎症细胞浸润;肾小球及肾小管组织形态基本正常,无明显改变。本模型梗阻早期,肾脏病变主要以肾间质炎症、充血、水肿为主;中后期则可出现肾脏间质纤维化,肾功能损害,肾小球逐渐萎缩,被薄层纤维组织替代。模型动物梗阻侧肾脏尿液菊糖浓度变化可准确反映肾小球滤过率降低的病理变化;肾脏组织纤维化形成过程中TGF-β1可持续过度表达。本模型方法简单,实用性强,易于标本反复收集,可用于动态研究。本模型制作过程中,导管插入长度应控制在2~3cm之间,避免因插入过长造成肾盂黏膜膜及肾实质损伤,导致肾盂内积血或感染,而使模型制作失败。

    (3)比较医学  单侧输尿管梗阻(unilateral ureteral obstruction, UUO)肾损伤模型以进行性肾小管间质纤维化为其主要特征,并伴有散在肾小球病变,但无高血压和脂质代谢异常。临床上单侧输尿管梗阻可由许多疾病引起,随着病程的不断发展,可引起不同程度的肾功能损害,直至肾功能丧失。肾小球及肾小管间质纤维化,其直接原因是多种细胞外基质(ECM)成分的积聚,如:纤黏蛋白(FN),Ⅰ、Ⅲ、Ⅳ型胶原,硫酸表皮素蛋白多糖(Biglycan)等多种蛋白多糖的积聚。一系列生长因子与细胞因子的改变与这些ECM成分的合成及代谢的调节密切相关,转化生长因子β1(TGF-β1)是其中重要的细胞因子之一。TGF-β1通过受体信号转导促进细胞合成胶原蛋白、纤维蛋白、层蛋白以及蛋白多糖等,调节组织正常的损伤修复,其过量生成则与慢性纤维化有关。本模型通过改进传统的单一性输尿管结扎的方法,采用输尿管内置管制备单侧输尿管梗阻,同样可获得与传统手术方法制备的相同的梗阻动物模型,且肾功能损害、纤维化病变特征典型,并证实模型动物可出现菊糖浓度降低及 TGF-β1浓度升高,可用于肾小管间质纤维化发病机制、药物治疗方面的动态、重复性研究。

    返回

    网站首页/关于我们

    新闻动态/技术文章

    产品中心 /荣誉与资质

    在线留言/联系我们

    JRD263蛋白组学服务

    JRD398原代细胞分离实验

    JRD290代谢组学价格

    荧光定量 PCR检测服务

    JRD403流式分选细胞实验

    联系电地:上海市长江南路180号长江软件园B区B636号

    点击这里给我发消息
     

    沪公网安备 31011302005922号