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    低铁饲料饲喂建立的缺铁性贫血大鼠模型

    点击次数:615 发布时间:2018-08-10

    低铁饲料饲喂建立的缺铁性贫血大鼠模型

    (1)复制方法  ①饲料组分除铁处理:先用去离子水配制1%的EDTA-2Na溶液,然后用盐酸调节溶液的pH值为1~2(以保留其他离子);按饲料:浸泡液=1kg:1.5L的比例浸泡饲料组分,放置于小型厚质塑料袋中,每浸泡24h(中途搅拌1~2次)后,换上新的浸泡液,对浸出液测定其总含铁量,直至浸出液的总含铁量小于0.1mg/L,再用新的浸泡液浸泡24h后结束浸泡。将浸泡好了的酪蛋白、玉米淀粉分别装于去除铁处理过的自制的三层厚密棉布袋中,用针线手工封口后在家用滚筒式脱水机内脱水,然后在温度为80~85℃的电热式烘箱内连袋烘烤,累计烘烤72~96h即可烘干。在浸泡、脱水、烘干过程中均注意要防尘及接触铁器。经除铁处理后酪蛋白、玉米淀粉含铁量分别为20.12,6.18μg/g。②低、中、高铁饲料的配制:用已经过去铁处理的酪蛋白和玉米淀粉按比例与其他组分混合成为低铁饲料,将未经去铁处理过的酪蛋白和玉米淀粉与其他组分按比例混合成为中铁饲料,在中铁饲料基础上再加入含铁量为30μg/g的枸橼酸铁作为高铁饲料,经测定低、中、高铁饲料含铁量分别为8.77μg/g、40.30μg/g、71.27μg/g。③模型建立:体重约为150g的雄性SD大鼠,均饲养于不锈钢笼内。分别给大鼠饲喂低铁、中铁、高铁饲料,饮用去离子水,并每天给予光照12h/2h的饲养条件。饲喂35d后,采大鼠血作血红蛋白及血清含铁量测定,随后颈椎脱臼处死动物。造模前后在预定时间内分别测定各组大鼠体重增长情况。

    (2)模型特点  用制备的除铁饲料喂养35d后,低铁组大鼠平均体重日增量小于中铁组与高铁组(分别为2.61g/ d,3.24g/d,3.24g/d),低铁组大鼠血清Hb、Fe测定值均达到贫血水平(<100g/L);低、中、高铁组大鼠的Hb与血清铁水平区分良好,能分别满足缺铁性贫血,缺铁但不贫血及正常水平三种实验模型要求。模型大鼠缺铁性贫血指标的测定结果,与以往采用低铁饲料辅以定期少量放血制备的缺铁性贫血模型的研究报道一致。

    (3)比较医学  采用本方法建立的缺铁性贫血模型与以往研究报道的缺铁性贫血动物模型,在造模方法上并不一致。是由于饲料缺铁所造成的。本模型制备方法降低大鼠血清铁、Hb的速度快、效果可靠。用本法建立缺铁性贫血动物模型的关键是饲料中除铁的处理过程,由于 EDTA-2Na能与Fe3+及Fe2+形成稳定性极强的络合物,所以饲料除铁处理过程中用EDTA-2Na浸泡除铁是有效的。同时为避免饲料中其他离子的损失而调节浸泡液pH值为1~2,这时其他离子的络合力可大大降低。本模型所用的饲料除Fe3+缺乏外,其他离子则由混合盐中加入,其含量符合大鼠营养学要求;造模结束后测定各组大鼠血清Cu与 Zn水平,缺铁组与中、高铁组测定值无显著差异。配制低铁饲料过程中关键的问题是防止铁的污染,本模型制备方法所摸索出的小型塑料袋浸泡法加浸出液总铁简易测定法,对防止饲料铁污染及指示浸泡过程的结束既简单又实用有效。缺铁性贫血模型复制过程中低铁饲料的配制,目前国内外普遍参考AOAC配方。但由于国内因饲料原料精度不够的限制,配制出来的低铁饲料难以达到造模要求,因此建立缺铁性贫血动物模型时常需辅以定期放血、溶血等辅助手段,使模型动物出现血容量减少、溶血等现象,干扰造模结果的评价。本模型采用的去除饲料组分中含铁量的方法,简便实用,同样可获得理想的模型制作效果。

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