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    失血性贫血动物模型

    点击次数:709 发布时间:2018-08-10

    失血性贫血动物模型

    失血是造成机体贫血常见的原因之一,临床上可分为急性和慢性两种。慢性失血常引起缺铁性贫血。由于外伤或疾病过程造成的血管破裂或止血机制缺陷,在短时间内大量失血而引起的贫血称为急性失血性贫血。引起急性失血的原因主要有:各种外伤及外科手术时的出血、消化道大出血、各种妇产科大出血、内脏破裂时的出血、大量肺或支气管咯血、炎症、肿瘤等侵袭血管壁引起的突然大出血以及各种止血机制有缺陷的疾病引起的出血等。急性失血可直接引起机体循环血量减少,动脉血压降低。由于化学感受器和肾上腺素的刺激作用,加深了加压反射,在神经体液的作用下,机体重新分配循环血液。除脑及心脏外,体内其他器官特别是腹腔内脏器、皮肤和肌肉的血管皆收缩,因而外周阻力增大,心率增快,以尽量保持体内重要器官的血流供应。此外,因毛细血管前阻力血管的收缩反映比较强烈,使毛细血管血压降低,组织液进入毛细血管。同时,因肾血流量减少,患者尿液排泄减少。通过这些代偿作用,血容量逐渐得到补充。失血也损失了血细胞,随着血容量的补充,血液稀释,红细胞和血红蛋白浓度降低,组织发生缺氧,体内红细胞生成素的代偿性分泌增多,促进骨髓造血功能,释放更多的红细胞。如果失血量过多,血容量减少1/3时,心输出量与动脉压大幅度下降,又不能及时补足血量,终会导致休克。在休克过程中,由于器官组织代谢障碍、酸中毒及毛细血管壁损害,可导致弥散性血管内凝血(DIC),结果使休克成为不可逆性,导致死亡。失血后的代偿作用需要时间,所以临床表现除个体状态外,决定于失血的量和速度,有无并发症以及患者的心理状况、体位、年龄、营养状态、心血管功能等。当出血量增加至1500~2000ml(约占总血量的40%),即使出血前患者很健康,出血后卧床休息,仍不免有口渴、恶心、气促、极度头晕甚至短暂意志丧失。由于血循环的重新分布,患者手足厥冷,面色苍白,尿量减少。血压、心输出量及中心静脉压均降低,脉搏快而无力,患者主诉头痛,逐渐出现休克症状,如烦躁不安、呼吸困难、脉搏细数、皮肤湿冷、恶心呕吐,后昏迷。失血性贫血动物模型的常用实验动物是小鼠、大鼠、兔和犬。

    (1)复制方法

    1)小鼠失血性贫血模型

        常用的小鼠造模法主要有眼眶后静脉丛放血法和剪尾尖或切开尾动脉法。

        ①眼眶后静脉丛放血法:用左手固定小鼠并轻轻对颈部施加压力,使头部静脉淤血,在突出的眼球旁分辨出后眼眶静脉,然后用少量10%可丨卡丨因滴入动物眼内,使眼部局部麻醉;右手持消毒过的毛细吸管从内侧眼角由鼻侧眼眶平行地向喉头方向轻压至后眼眶静脉丛,血液自然吸入管内,放血6~8滴(约0.5ml)。毛细吸管内径0.5~1.0mm,可用聚氯乙烯管或玻璃毛细管制成,采血时毛细管与鼠面成45°角,在泪腺区域内,由眼内角在眼睑和眼球之间向喉头方向刺入。若为针头,其斜面先向眼球,刺入后再转l80°角使斜面对着眼眶后界刺入深度为2~3mm,当达到蝶骨感到有阻力时,再稍后退0.1~0.5mm,边退边抽。把取血管保持水平位,稍加旋转并后退吸引。由于血压关系,血液即自动流入吸血管中,得到所需血管后,即除去加于颈部的压力,同时拔出采血管,以防止术后穿刺孔出血.并用消毒纱布或棉球压迫眼球止血30s。一般20g左右体重小鼠每鼠从眼眶静脉丛抽血0.5ml。如隔日放血1次,连续5次可形成慢性失血性贫血模型。失血后24h形成急性失血性贫血模型。

        ②剪尾尖或切开尾动脉法:小鼠剪尾放血:用手揉擦或用温水(45~50℃)加温鼠尾,使之充分充血后,用剪刀剪去尾尖约2mm,用手轻轻从尾根部向尾尖部挤压,使失血量达0.5ml左右。

    2)大鼠失血性贫血模型

        一般大鼠造模有心脏放血法和静脉多次放血法。

        ①大鼠心脏放血:从心脏抽血,抽血量约为总血量的1/4。大鼠心脏采血方法:将动物仰卧固定板上,剪去胸前区部位的被毛,用碘酊、乙醇消毒皮肤。在左侧第3、第4肋间,用左手食指摸到心搏处,右手持带有4~5号针头的注射器,选择心搏丨强处刺人。当针头刺人心脏时,血液由于心脏跳动的力量自动进入注射器。心脏采血约为总血量的1/4(总血量按体重6%计算)。

        ②大鼠尾静脉多次放血法:体重为180~200g大鼠,经其尾部放血1.5~2ml/只,隔日一次,连续5次,即可制作成慢性失血性贫血模型。

    3)兔或犬失血性贫血模型

        将动物常规麻醉后仰卧固定在手术台上,用无菌操作分离其股动脉或颈动脉,插管,按动物体重计数一次或多次放血量。家兔一次性放血占全血量30%,犬按40ml/kg体重量放血,可反复几次,即可造成失血性贫血模型。

        (2)模型特点  以上几种造模方法失血方法简单,指标明确,不需特殊设备,但失血量难以一致。可用于一般缺铁性贫血的新药药效学筛选,缺铁性(失血性)贫血模型较为合理。造模成功的指标为RBC、Hb下降,同放血前有显著性差异。值得注意的是用小鼠尾动脉放血时应使其尾部充分充血,否则难以使放血量达到要求量。眼眶采血达足量时,应迅速以消毒棉球压迫眼球止血。

        (3)比较医学  啮齿类动物、兔、犬等常用实验动物均可复制失血性贫血模型,且造模方法均很简单、可靠。但采用不同动物制作模型在操作方法及制作成本方面差异较大,应根据实验目的来选择模型动物。

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