乳酸脱氢酶诱导颞下颌关节骨关节病动物模型

乳酸脱氢酶诱导颞下颌关节骨关节病动物模型

(1)复制方法  体重为2.0～2.5kg，经检查无牙颌畸形的雌性成年新西兰兔，按1mg/kg体重的剂量经耳缘静脉注射2.5g/L的戊丨巴丨比丨妥丨钠麻醉后，无菌条件下只在双侧颞下颌关节(temporomandibular joint, TMJ)作关节上腔穿刺，低浓度组在双侧TMJ上腔均注射100U LDH(用0.9％生理盐水配制)0.1ml；高浓度组只在双侧TMJ上腔均注射200单位LDH 0.1ml。穿刺或注射后分别于24h，1、4、8、12周行过量注射麻醉药方法处死动物，取颞下颌关节标本观察。 TMJ穿刺方法在兔子外眦后下方可扪及两个小结节，分别为眶下缘和髁突后极。作TMJ穿刺时，在两个小结节之间进针，针头指向前、内、下，均与眶下缘平行，进针约0.5cm后，可有脱空感，回抽无血，偶尔有少许黏稠淡黄色液体，即关节液，注射药物后可回抽，此时表明针尖在TMJ腔内。

(2)模型特点  模型动物各个时间段关节病变程度有所不同，高浓度组病变程度均较低浓度组病变严重。光学显微镜下：早期(1～4周)未见明显病变。后期(4～12周)，纤维软骨层变薄，纤维软骨各层结构排列紊乱，关节盘胶原纤维玻璃样变性，滑膜增厚细胞成分增多，部分区域骨质暴露，髁突部分区域骨质变性，关节盘胶原纤维变性，断裂。扫描电镜下早期(1～4周)关节各结构表面未见明显异常。后期(4～12周)，关节盘上表面凝胶层变薄，网状的胶原纤维暴露，凝胶层物质脱落，关节盘表面波纹变浅，甚至消失，髁突表面波纹变浅，凝胶层剥脱，网状胶原纤维丝暴露，大量胶原纤维束卷起裸露，在髁突前斜面功能区，波纹结构消失，凝胶层变薄。大量胶原纤维丝暴露。模型动物均于注射后4周出现特征性骨关节病病损，并可随时间推移而加重。

(3)比较医学  本模型采用病理组织学、扫描电镜等研究手段，对模型动物各时间段关节软骨关节盘病变进行了观察，发现病变损伤与其他方法如肿瘤坏死因子(TNF)、牙合创伤等引起的关节损害相似，说明本模型制作方法具有良好的可比性，符合动物模型的基本要求。由于未观察到模型动物的关节盘有穿孔现象，说明本模型的关节病变处于早、中期，因此所建立的动物模型适用于早、中期关节病变的实验研究。采用本方法诱导的兔TMJ OA模型，制作方法简便易行，病变典型，且兔及乳酸脱氢酶均容易获得，价格适宜，是较为理想的动物模型。