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    乳酸脱氢酶诱导颞下颌关节骨关节病动物模型

    点击次数:558 发布时间:2018-07-06

    乳酸脱氢酶诱导颞下颌关节骨关节病动物模型

    (1)复制方法  体重为2.0~2.5kg,经检查无牙颌畸形的雌性成年新西兰兔,按1mg/kg体重的剂量经耳缘静脉注射2.5g/L的戊丨巴丨比丨妥丨钠麻醉后,无菌条件下只在双侧颞下颌关节(temporomandibular joint, TMJ)作关节上腔穿刺,低浓度组在双侧TMJ上腔均注射100U LDH(用0.9%生理盐水配制)0.1ml;高浓度组只在双侧TMJ上腔均注射200单位LDH 0.1ml。穿刺或注射后分别于24h,1、4、8、12周行过量注射麻醉药方法处死动物,取颞下颌关节标本观察。 TMJ穿刺方法在兔子外眦后下方可扪及两个小结节,分别为眶下缘和髁突后极。作TMJ穿刺时,在两个小结节之间进针,针头指向前、内、下,均与眶下缘平行,进针约0.5cm后,可有脱空感,回抽无血,偶尔有少许黏稠淡黄色液体,即关节液,注射药物后可回抽,此时表明针尖在TMJ腔内。

    (2)模型特点  模型动物各个时间段关节病变程度有所不同,高浓度组病变程度均较低浓度组病变严重。光学显微镜下:早期(1~4周)未见明显病变。后期(4~12周),纤维软骨层变薄,纤维软骨各层结构排列紊乱,关节盘胶原纤维玻璃样变性,滑膜增厚细胞成分增多,部分区域骨质暴露,髁突部分区域骨质变性,关节盘胶原纤维变性,断裂。扫描电镜下早期(1~4周)关节各结构表面未见明显异常。后期(4~12周),关节盘上表面凝胶层变薄,网状的胶原纤维暴露,凝胶层物质脱落,关节盘表面波纹变浅,甚至消失,髁突表面波纹变浅,凝胶层剥脱,网状胶原纤维丝暴露,大量胶原纤维束卷起裸露,在髁突前斜面功能区,波纹结构消失,凝胶层变薄。大量胶原纤维丝暴露。模型动物均于注射后4周出现特征性骨关节病病损,并可随时间推移而加重。

    (3)比较医学  本模型采用病理组织学、扫描电镜等研究手段,对模型动物各时间段关节软骨关节盘病变进行了观察,发现病变损伤与其他方法如肿瘤坏死因子(TNF)、牙合创伤等引起的关节损害相似,说明本模型制作方法具有良好的可比性,符合动物模型的基本要求。由于未观察到模型动物的关节盘有穿孔现象,说明本模型的关节病变处于早、中期,因此所建立的动物模型适用于早、中期关节病变的实验研究。采用本方法诱导的兔TMJ OA模型,制作方法简便易行,病变典型,且兔及乳酸脱氢酶均容易获得,价格适宜,是较为理想的动物模型。

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