Elisa试剂盒试验过程中需要特别注意的细节

　　Elisa试剂盒是固相夹心法酶联免疫吸附实验（ELISA）、已知浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。先将生物素标记的抗体同时温育。洗涤后，加入亲和素标记过的HRP。再经过温育和洗涤，去除未结合的酶结合物，然后加入底物A、B，和酶结合物同时作用。产生颜色。颜色的深浅和样品中的浓度呈比例关系。
      Elisa试剂盒试验过程中需要特别注意的细节
　　1、试剂准备：试剂都在使用前达到室温，使用后请立即按照说明书要求保存。实验操作中使用一次性吸头，避免交叉污染；
　　2．加样：加样时，要控制加样速度，避免*孔与后一孔之见的时间间隔过大，否则将会导致不同的预孵育时间，从而影响实验的准确性以及重复性；一般加样时间控制在10分钟内，如果样本数量过多，可使用多道移液器；
　　3、建议实验前预测样品含量，如样品浓度过高，应对样品进行稀释，计算结果时乘以相应的稀释倍数；
　　4、洗涤：洗涤过程中反应孔中的残留的洗涤液应在滤纸上充分拍干，同时要消除板底残留的液体和手指痕迹，避免影响后的酶标仪读数；
　　5、反应时间的控制：加入底物后请定时观察反应孔的颜色变化（比如，10分钟左右），如果颜色较深，请提前加入终止液终止反应；
　　6、孵育：样品要在密闭的容器内进行孵育，严格按照说明书上规定的孵育时间和温度进行；
　　7、建议使用本试剂盒时先做预实验（即先做标准曲线，试用几个标本），如果对本试剂盒有疑问，可与厂家咨询
　　Elisa试剂盒是免疫诊断中的一项新技术，现已成功地应用于多种病原微生物所引起的传染病、寄生虫病及非传染病等方面的免疫诊断。也已应用于大分子抗原和小分子抗原的定量测定，根据已经使用的结果，认为ELISA法具有灵敏、特异、简单、快速、稳定及易于自动化操作等特点。不仅适用于临床标本的检查，而且由于一天之内可以检查几百甚至上千份标本,因此，也适合于血清流行病学调查。本法不仅可以用来测定抗体，而且也可用于测定体液中的循环抗原，所以也是一种早期诊断的良好方法。因此ELISA法在生物医学各领域的应用范围日益扩大。