ELISA试剂盒常见问题及简单处理方法

　　目前ELISA试剂盒的使用不仅是在科研和医疗上，一般的家庭也会购买用于检测一些日常疾病。并且由于国产ELISA试剂盒的特异性和灵敏性高不断提高，在日后ELISA试剂盒会越来越普及的。不过对于普通的百姓来说，无论使用国产ELISA试剂盒还是进口ELISA试剂盒都会出现一些问题，那么在遇见这些问题的时候应该怎么解决呢?以下是一些比较常见的问题：

　　1、试剂的选择：选择优良试剂大家都是知道的，但是在检测之前还应该提前半个小时将试剂拿到常温下进行解冻。

　　2、加样中可能遇到的问题：在做血清或是血浆用于检测试剂的时候，会碰到血清血浆不好分离的情况，这个时候的解决办法好是先放在常温中1到2小时，然后在进行离心处理

　　3、洗板时容易造成误差：因为洗板是人工洗的，所以判断什么时候洗干净了也是人为判断的，这个时候带有主观色彩，所以好多清洗几次，还有就是在洗的时候孔与孔之间的液体容易交叉流动

　　4、显色问题：使用了过期的显色剂或者是显色剂用过后放置时间太长，都有可能造成显色剂不显色。所以在进行显色反应的时候，要先查看显色剂本身的情况

　　5、终止反应：在加终止剂的时候由于倾倒速度快，差生气泡，造成假阳性结果。所以在倒终止剂的时候要缓慢倒可

　　6、读板：读板的时候先应该板的清洁干净。

　　ELISA试剂盒应注意避免溶血，红细胞溶解时会释放出具有过氧化物酶活性的物质，以HRP为标记的ELISA测定中，溶血标本可能会增加非特异性显色。血清标本宜在新鲜时检测。如有细菌污染，菌体中可能含有内源性HRP，也会产生假阳性反应。如在冰箱中保存过久，其中的可发生聚合，在间接法ELISA中可使本底加深。一般说来，在5天内测定的血清标本可放置于4℃，超过一周测定的需低温冰存。冻结血清融解后，蛋白质局部浓缩，分布不均，应充分混匀宜轻缓，避免气泡，可上下颠倒混和，不要在混匀器上强烈振荡。混浊或有沉淀的血清标本应先离心或过滤，澄清后再检测。反复冻融会使抗体效价跌落，所以测抗体的血清标本如需保存作多次检测，宜少量分装冰存。保存血清自采集时就应注意无菌操作，也可加入适当防腐剂。